Влияние анаприлина на активность ферментов обмена регуляторных пептидов в нервной ткани крыс

Влияние анаприлина на активность ферментов обмена регуляторных пептидов в нервной ткани крыс

ВЛИЯНИЕ АНАПРИЛИНА НА АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ ОБМЕНА РЕГУЛЯТОРНЫХ ПЕПТИДОВ В НЕРВНОЙ ТКАНИ КРЫС

биологический фермент гипоталамус крыса

Сметанин В.А., Бардинова Ж.С., Даркина Ю.Ф., Венедиктов А.А., Генгин М.Т.

Важное место в современной фармацевтической практике занимают препараты, воздействующие на адренергическую систему, в частности β-адреноблокаторы, к числу которых относится анаприлин. За счет блокады β1-адренорецепторов он оказывает выраженное угнетающее влияние на деятельность сердца, а за счет блокады β2-адренорецепторов повышает тонус бронхов и периферических сосудов, но при длительном постоянном применении анаприлина повышение тонуса сосудов сменяется его снижением. Общепризнано, что первичная фармакологическая реакция анаприлина связана с блокированием специфических рецепторов. Однако все многообразие фармакологических эффектов (в частности, способность вызывать сонливость, депрессию и т.д.) трудно объяснить только с этой позиции [1].

В последнее время установлено, что при введении адреномиметиков и адреноблокаторов наблюдаются изменения в уровне целого ряда нейропептидов: ангиотензина II, вазопрессина, вещества Р, β-эндорфина [2]. Многие из которых играют важную роль в этиологии и патогенезе алкоголизма, наркомании, шизофрении, депрессивно-маниакального синдрома - заболеваний, в развитии которых участвует и адренергическая система [3].

Возможно, что через пептидергическую систему опосредуется значительная доля физиологических эффектов, вызванных изменениями в функционировании адренергической системы. Активная форма регуляторных пептидов образуется в результате протеолитического процессинга пропептидов, в конечной стадии которого принимают участие основные карбоксипептидазы - экзопептидазы, отщепляющие «лишние» остатки аргинина и лизина с С-конца пропептидов. К основным карбоксипептидазам относятся карбоксипептидаза Н (КПН) и фенилметилсульфонилфторид-ингибируемая карбоксипептидаза (ФМСФ-КП), исследование их активности при введении β-адреноблокатора анаприлина может способствовать уточнению биологической роли этих ферментов в механизмах взаимодействия адренергической и пептидергической систем.

Объектом исследования служили гипофиз, гипоталамус, стриатум, гиппокамп, большие полушария и четверохолмие самцов крыс массой 350-400 г. В работе использовали две группы крыс: контрольную и опытную. Животные опытной группы получали в течение двух недель в качестве единственного источника жидкости водный раствора анаприлина, содержащий 5 % раствор сахарозы, при этом средняя доза препарата составляла 150 мкг/кг/сут; животные контрольной группы - 5 % раствор сахарозы.

Активность ферментов определяли флюорометрическим методом: КПН с использованием в качестве ингибитора гуанидиноэтилмеркаптоянтарной кислоты и дансил-фен-ала-арг в качестве субстрата при рН 5,6 [4]; ФМСФ-КП - с использованием ингибитора ФМСФ и субстрата дансил-фен-лей-арг [5]. Концентрацию белка в пробах определяли по методу Lowry [6]. Достоверность отличий между средними определяли с использованием t-критерия Стьюдента.

Результаты исследований показали (таблица 1), что активность ФМСФ-КП в группе животных, потреблявших анаприлин в гипофизе, гиппокампе и четверохолмии была выше в 1,9, 5,3 и 1,7 соответственно по сравнению с контролем. Активность КПН также увеличивалась в опытной группе по сравнению с контрольной: в гипоталамусе в 2,4 раза, в стриатуме в 3 раза и в четверохолмии в 2 раза.

Таблица 1. Влияние потребления анаприлина на активность ФМСФ-КП и КПН (нмоль продукта, образовавшегося за 1 мин. инкубации на 1 мг белка, М±m, n = 4-5).

Отдел нервной системыФМСФ-КПКПНконтрольанаприлинконтрольанаприлинГипофиз0,14 ± 0,030,26 ± 0,19***0,32 ± 0,170,43 ± 0,03Гипоталамус0,13 ± 0,0030,28 ± 0,020,45 ± 0,191,08 ± 0,07**Стриатум0,11 ± 0,030,18 ± 0,030,16 ± 0,010,48 ± 0,01***Гиппокамп0,08 ± 0,010,42 ± 0,02***0,45 ± 0,150,57 ± 0,13Большие полушария0,14 ± 0,010,13 ± 0,0040,41 ± 0,080,47 ± 0,01Четверохолмие0,09 ± 0,020,15 ± 0,02*0,36 ± 0,0020,72 ± 0,15*

Примечание: достоверность отличий: * - р<0,05; ** - р<0,01; *** - р<0,001 относительно контроля

Таким образом, получение животными анаприлина приводит к существенному увеличению активности ферментов обмена регуляторных пептидов в ряде отделов мозга. Это свидетельствует о том, что активность КПН и ФМСФ-КП регулируется состоянием адренергической системы. Изменение активности исследуемых карбоксипептидаз через адренергическую систему может влиять на уровень регуляторных пептидов в мозге и плазме крови, а через пептиды - на функционирование других систем организма, и, соответственно, на состояние сердечно-сосудистой системы, а также на эмоциональный статус, поведение и другие функции высшей нервной деятельности.

Литература

1. Преображенский Д.В., Сидоренко Б.А., Романова Н.Е., Шатунова И.М. Клиническая фармакология основных классов антигипертензивных препаратов // Consilium Medicum. - 2000. - Т. 2, № 3. - С. 99-127.

. Лебедев А.А. Система ренин-ангиотензин // Соровский образовательный журнал. - 1998, № 3. - С. 35-40.

. Нейрохимия // Под ред. Ашмарина И.П., Стукалова П.В. - М.: Изд-во Института биомед. химии РАМН, 1996. - 470 с.

4. Fricker L.D., Snyder S.H. Purification and characterization of enkephalin convertase, an enkephaline-synthesizing carboxypeptidase // J. Biol. Chem. - 1983. - 258, № 18. - P. 10950-10955.

. Вернигора А.Н., Никишин Н.Н., Генгин М.Т. Частичная характеристика основной фенилметилсульфонилфторид-ингибируемой карбоксипептидазы из головного мозга кошки // Биохимия.- 1995.- 60, № 11.- С. 1860-1866.

. Lowry O.H., Rosebrought N.J., Farr A.G., Randall R.J. Protein measurement with Folin phenol reagent // J. Biol. Chem. - 1951. - 193, № 1. - P. 265-275.