Лабораторный надзор за гриппом и ОРЗ в г. Воронеже и области в 2006-2007 гг.
Лабораторный надзор за гриппом и ОРЗ в г. Воронеже и
области в 2006 - 2007 гг.
Агеева
О.Т., Жарикова О.С.
Грипп и
другие ОРЗ остаются до настоящего времени наиболее распространенными,
неуправляемыми и единственными действительно массовыми заболеваниями. Грипп и
ОРЗ занимают первое место среди инфекций, вызывающих наибольшее количество
смертей в мире. («Хит-парад главных убийц» - данные журнала Medical Microbiology,
2004 год )
В структуре инфекционной заболеваемости Воронежской
области грипп и гриппоподобные заболевания составляют 91,7% и остаются одной из
наиболее актуальных медицинских проблем.
В последние годы
эпидемическая ситуация по гриппу осложнилась появлением высокопатогенных
антигенных вариантов вируса гриппа «птичьего» происхождения. Хотя вирус в настоящее время еще не приобрел
способности к широкой трансмиссии в человеческой популяции, что означало бы
начало новой пандемии, вполне вероятно, что человечество стоит на пороге этого
события.
В этой ситуации резко повышается значимость
лабораторных исследований по гриппу, обеспечивающих возможность раннего
распознавания этиологии пандемии, с последующим проведением всего комплекса
противоэпидемических и профилактических мероприятий.
Лабораторная диагностика гриппа и ОРВИ осуществляется
согласно приказу №373 от 31 марта 2005 года «О совершенствовании системы
эпиднадзора и контроля за гриппом и ОРВИ» и Постановления №13 главного
государственного санитарного врача по Воронежской области.
Эпидемиологическим отделом Управления Роспотребнадзора
определены ЛПУ, которые входят в состав опорной базы и доставляют материал для
исследований согласно графика. Информация о выполнении графика и результаты
исследований представляются ежемесячно в Управление Роспотребнадзора. Также в
еженедельном режиме данные о результатах исследований отправляются в Федеральный
центр по гриппу.
Эпидемиологическая
ситуация в 2006 году и 10 мес. 2007г в г. Воронеже и области по заболеваемости
острыми респираторными вирусными инфекциями складывалась с тенденцией к
сезонному росту. Превышение эпидемического порога в 1,1 – 1,5 раза отмечалось в
возрастных группах детского населения 3-6 лет и 7-14 лет.
Для расшифровки этиологии
очередного подъема заболеваемости гриппом мы применяли комплекс
вирусологических и серологических методов, включающий в себя классический метод
выделения вирусов гриппа в клеточной культуре МДСК, постановку РТГА с парными
сыворотками и исследования методом флюоресцирующих антител.
Выделение вирусов
гриппа
Важным преимуществом
этого метода является получение инфекционного вируса, который может быть далее
использован для антигенного и генетического анализа, а так же выяснения таких
важных свойств возбудителя, как чувствительность к химиопрепаратам,
неспецифическим ингибиторам, тропизм к разным системам организма хозяина.
Для размножения вирусы, в
отличие от бактерий, используют репродуктивный аппарат зараженной клетки и,
следовательно, могут размножаться только в живых клетках организма. ВОЗ была
рекомендована перевиваемая культура клеток, полученная из почек собаки породы
голубой спаниель – клеточная культура МДСК.
Непременным условием успешного
выделения вирусов являются правильный сбор клинических материалов и соблюдение
условий доставки материалов в лабораторию. Материалом для изоляции вирусов
служит отделяемое из глубоких отделов носовой полости, зева, а так же
секционные ткани легкого, бронхов и мозга. Материал отбирают в первые 3 дня
болезни. Пробирки с материалом незамедлительно доставляют в лабораторию с
соблюдением холодового режима.
В 2006 году по результатам исследования материалов от
400 больных нами было выделено 23 вируса гриппа А/Н3N2/. В 2007 году
вирусологическим методом были исследованы материалы от 542 больных с выделением
12 штаммов вируса гриппа В, 11 вируса гриппа А/Н3N2/, 16 штаммов
гриппа А/Н1N1/.
Все выделенные штаммы были оттипированы в лаборатории
диагностическими сыворотками производства НИИ гриппа и отправлены в Федеральный
центр по гриппу для дальнейшего изучения.
В 2006 году первые штаммы вирусов были изолированы 20
февраля (на 8 неделе 2006 года). Наиболее высокая частота выделения этих
вирусов отмечена в феврале- марте и составила 9,6% и 8,3% соответственно. В
апреле выделяемость вирусов снизилась до 5%. Вирусы выделялись во всех
возрастных группах, но самый высокий уровень выделения установлен в возрастной
группе старше 15 лет.. Достаточно активная циркуляция вирусов гриппа А/Н3N2/
продолжалась до середины апреля. По данным Федерального центра по гриппу все
вирусы относятся к эталонному варианту А /Висконсин/67\05.
В 2007 году первые штаммы вирусов гриппа были
изолированы 2 февраля (на 6 неделе 2007 г). Наиболее высокая частота выделения
была отмечена также в феврале-марте. Причем вирусы гриппа В преобладали в
структуре выделенных штаммов в феврале, а вирусы гриппа А/Н3N2/ и
гриппа А/Н1N1/ в марте-апреле. Таким образом в 2007 г сезонный
подъем заболеваемости гриппом был смешанной этиологии: с преобладанием вирусов
гриппа В в начале сезонного подъема и последующей активизацией (уже весной 2007
года) вирусов гриппа А/Н3N2/ и А/Н1N1/. По результатам антигенного
анализа вирусы гриппа А/Н1N1/ были подобны эталону А/Соломоновы Острова/3/06,
гриппа А/Н3N2/-эталону А\Висконсин/67\05, гриппа В-эталону В/
Малайзия\2506/04.
Иммунофлуоресцентный анализ
Прямой метод иммунофлуоресцентного анализа позволяет
идентифицировать антигены вирусов гриппа и других возбудителей ОРВИ непосредственно
в инфицированных клетках. К числу преимуществ метода относится его простота и
возможность быстрого анализа клинических материалов с распознаванием широкого
круга возбудителей, включая вирусы гриппа, парагриппа, респираторно-сентициальный
вирус, аденовирусы.
Иммунофлюоресцентным методом за отчетный период было
проанализировано 2584 клинических материалов от больных ОРВИ. В 2006 году
частота диагностирования гриппа А/Н3N2/ составила 9,7%, гриппа В –
0,5%. Наиболее высокий уровень диагностирования отмечен в феврале и марте и
составил 6,7% и 16,5% соответственно. В 2007 году грипп А/Н3N2/
диагностировался с частотой 1,9 %, грипп А/Н1N1/- 4,2%, грипп
В -3,9%. Пик заболеваемости совпал с максимальной частотой МФА диагностирования
вирусов гриппа. Активную роль в этиологии ОРВИ занимали аденовирусы (12,6% в
2006 году и в 2007 году), вирусы парагриппа (4,5% в 2006 году, 2,7% в 2007
году), респираторно-синцитиальный вирус (1,1% в 2006 году, 0,6% в 2007 году),
которые, в отличие от вирусов гриппа, циркулировали на протяжении всего сезона.
Серологический анализ
Серологические реакции, такие, как реакция торможения гемагглютинации
(РТГА), применяются для определения уровня
специфических антител в сыворотках больных ОРЗ с целью ретроспективного
подтверждения диагноза.
В 2006 году результаты ретроспективных серологических
исследований подтвердили данные МФА о ведущей роли вируса А/Н3N2/ в
динамике развития эпидемии. Диагностический прирост антител во второй сыворотке
выявлен у 24,1% обследованных. Участие вируса гриппа В в заболеваемости сезона
2006 года было незначительным. Грипп В выявлялся у 0,9% обследованных.
В 2007 году смешанный характер эпидемии с участием
вируса гриппа А/Н3N2/, А/Н1N1/ и гриппа В был также
подтвержден серологической диагностикой.
Диагностическое нарастание титров антител к вирусу
гриппа А/Н3N2/ было выявлено у 9,9% больных, к вирусу гриппа А/Н1N1/ у
8,8 % больных и к вирусу гриппа В у 7,8 % больных.
Таким образом можно сделать следующие выводы :
1.
Благодаря использованию комплекса
методов серологической и вирусологической диагностики удалось расшифровать
очередной подъем заболеваемости гриппом и ОРВИ и подтвердить важность
адекватного выбора биологического объекта для культивирования вируса.
2.
Эпидемический подъем
заболеваемости ОРВИ в сезон 2006 года был обусловлен циркуляцией вируса гриппа
А/Н3N2/. В 2007 году эпидемический подъем заболеваемости
был смешанной этиологии с участием вирусов гриппа А/Н3N2/, А/Н1N1/ и
гриппа В.
3.
Активную роль в этиологии ОРВИ
занимали аденовирусы, вирусы парагриппа, респираторно-синцитиальный вирус.