Химико-токсикологический анализ производных фенотиазина
Министерство
Здравоохранения РФ
Дальневосточный
Государственный Медицинский Университет
Кафедра
органической и токсикологической химии
Прочко Д.В.
ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ
ПРОИЗВОДНЫХ ФЕНОТИАЗИНА
Хабаровск, 1998
Оглавление
Введение_______________________________________________________________________ 2
Токсикологическое значение и метаболизм_________________________________________ 2
Изолирование производных фенотиазина из
биологического материала_______________ 3
Качественное обнаружение производных фенотиазина
в экстракте__________________ 4
Количественное определение производных
фенотиазина и их метаболитов___________ 5
В России и за рубежом, начиная
с 1945 г., после обнаружения фармакологической активности N-замещенных производных фенотиазина, было синтезировано большое число препаратов,
обладающих нейролептическим, противогистаминным, холинолитическим, седативным,
антиаритмическим и коронарорасширяющим действием.
В основе химической структуры данной группы
препаратов лежит гетероциклическая система, состоящая из шестичленного
гетероцикла тиазина, конденсированного с двумя ядрами бензола (рис. 1).
Препараты фенотиазинового ряда,
так же как и другие психотропные, антигистаминные и сердечно-сосудистые
средства, кроме собственно терапевтического эффекта, проявляют побочное и
токсическое действие. Введение их в организм в дозах, превышающих
терапевтические (медицинские ошибки, бытовые и суицидальные отравления),
нередко приводит к летальным исходам. Описано большое количество отравлений
этими соединениями, нередко в сочетании с другими лекарственными препаратами
(барбитуратами, производными изоникотиновой кислоты, имизином, антибиотиками,
инсулином и др.).
Производные фенотиазина
обладают кумулятивными свойствами и длительно выводятся из организма. Например,
терапевтическая доза аминазина (50 мг) выводится из организма в течение 14-20
дней. Смертельные случаи могут наблюдаться при приемах обычных терапевтических
доз.
Клиника течения отравлений
производными фенотиазина во многом зависит от возраста, пола, дозы принятого
лекарства и не является характерной и специфичной. Нехарактерна также и
патологоанатомическая картина. Химическое исследование крови и мочи больных, а
также внутренних органов и биологических жидкостей погибших могут оказать
существенную помощь в диагностике отравления.
Биотрансформация производных
фенотиазина идет по основным типам метаболизма; сульфоокисление,
деметилирование, образование N-оксида, гидроксилирование и
т. д. Главным метаболитом, общим для всех производных фенотиазина, является
сульфоксид (рис. 2).
Объектами исследования на производные
фенотиазинового ряда являются желудок и кишечник с содержимым, печень, легкие,
почки, кровь и моча.
В трупном материале
производные фенотиазина и их метаболиты сохраняются (при температуре от –20
до +130С) до 3 месяцев. Консервирование материала этиловым спиртом
увеличивает сохраняемость производных фенотиазина в трупном материале.
По физико-химическим свойствам
препараты, производные фенотиазина, представляют собой белые кристаллические
порошки, растворимые или слаборастворимые в воде, хорошо растворимые в этиловом
спирте (в виде солей), диэтиловом эфире и хлороформе (в виде оснований).
Изолирование аминазина,
дипразина и их метаболитов рекомендуется производить спиртом, подкисленным до
рН 2,0-3,0 10% раствором щавелевой кислоты, с последующей экстракцией основания
эфиром при рН 13,0 и реэкстракцией вещества в 0,5 н раствор серной кислоты
(изолирование по Е.М. Саломатину).
Также изолирование производных
фенотиазина можно проводить путем экстракции из биологического материала
подкисленной водой, с последующей экстракцией органическим растворителем
(диэтиловый эфир, хлороформ) из этого раствора, подщелоченного с помощью 25% раствора
аммиака.
1.
С растворами йодида висмута в йодиде калия и
фосфорно-молибденовой кислоты производные фенотиазина дают аморфные осадки
2.
С концентрированной серной кислотой возникает
устойчивое пурпурно-красное окрашивание
3.
С формалином и серной кислотой производные
фенотиазина дают пурпурно-красное окрашивание, усиливающееся при стоянии
4.
С концентрированной азотной кислотой возникает пурпурно-красное
окрашивание (образование сульфоксида), которое быстро исчезает (образование
сульфона)
5.
С 5% раствором золотохлористо-водородной кислоты аминазин
(после 3-4 кратной обработки основания 0,1 н. раствором HCl) выделяется темно-красный аморфный осадок, переходящий через 20-50 мин.
в характерный кристаллический осадок. Кристаллы в виде палочек и сростков из
них, напоминают снопы и сфероиды. Кристаллы оптически активны (погасание косое,
угол погасания 20-300, удлинение кристаллов положительное).
6.
С реактивами Марки и Фреде тизерцин дает
синевато-красную окраску; окраска у других производных фенотиазина — от красной
до фиолетовой
7.
С реактивом Манделина тизерцин дает
красно-фиолетовую окраску; дипразин дает зеленую, переходящую в пурпурную
окраску. Окраска у других производных фенотиазина — от красной до фиолетовой
Более надежный
способ обнаружения производных фенотиазина в экстракте, а тем более для
различения веществ друг от друга — обнаружение и разделение веществ с помощью
хроматографии. Для этого на хроматографическую пластинку наносят каплю
исследуемого раствора. Нанесенное пятно подсушивают на воздухе. Рядом наносят
растворы известных препаратов, производных фенотиазина («свидетели») и вновь
подсушивают пластинку. Затем пластинку вносят в камеру для хроматографии,
насыщенную парами растворителя (смесь 25% раствора аммиака и этилового спирта в
соотношении 1:1, либо 25% раствора аммиака, этилацетата и ацетона 4:90:45).
После хроматографирования пластинку проявляют 50% раствором серной кислоты в
этиловом спирте. Затем пластинку помещают на 3-5 мин в сушильный шкаф, нагретый
до 1000С. Проявившееся пятна сравнивают с пятнами «свидетелей» или
по справочным значениям Rf.
Обнаружить
производные фенотиазина можно также по УФ- и ИК-спектрам. Например, раствор
тизерцина в этиловом спирте имеет максимумы поглощения при длине волны 255 и
310 нм, а аминазин при 254-255 нм. Основной метаболит — сульфоксидное
производное фенотиазина имеет максимумы поглощения при длине волны 238-240,
273, 298 и 340 нм. Тизерцин в растворе 0,1 н. соляной кислоты имеет максимум в
области 251 и 302 нм. Дипразин, растворенный в 0,01 н. растворе соляной
кислоты, имеет максимумы поглощения при 249 и 300 нм; растворенный в смеси воды
и этилового спирта (1:1) — 252 и 301 нм. В ИК-области спектра основание
тизерцина (диск с бромидом калия) имеет основные пики при 1587, 1460, 1269 и
1446 см-1; дипразин имеет пики при 1459, 1222 и 757 см-1.
Фотоколориметрический метод
определения основан на реакции с концентрированной серной кислотой.
Фотометрирование проводят при λ=508 нм в кювете 5,105; эталон сравнения —
контроль реактивов. Расчет содержания препаратов производится по калибровочному
графику.
По этим методикам
обнаруживается 53-60% препарата, добавленного к органам. Граница обнаружения
0,2 мг, граница определения 0,5 мг препарата в 100 г органов.