Валидационная оценка методики анализа лекарственной формы состава: натрия хлорида 0,5; натрия ацетата 0,2; воды очищенной до 1 л

Валидационная оценка методики анализа лекарственной формы состава: натрия хлорида 0,5; натрия ацетата 0,2; воды очищенной до 1 л

ГОУ ВПО Пятигорская государственная

фармацевтическая академия Росздрава

зав. кафедрой проф. Е.Н. Вергейчик

КУРСОВАЯ РАБОТА

по фармацевтической химии на тему:

Валидационная оценка методики анализа лекарственной формы состава: натрия хлорида 0,5; натрия ацетата 0,2; воды очищенной до 1 л

Исполнитель: Студент 5 курса 20 группы

Бойко Денис Викторович

Руководитель: Волокитин Сергей Васильевич

Пятигорск, 2010

1. Введение

Фармакологическая группа веществ Натрия ацетат и Натрия хлорид. Регуляторы водно-электролитного баланса и КЩС в комбинациях <#"484193.files/image001.gif"> CH₃COOCH₂CH₃ + H₂O

Аналитический эффект: характерный фруктовый запах этилацетата.

2. По реакции с хлоридом железа (III)

3FeCl₃ + 9CH₃COO^- + 2H₂O →

[(CH₃COO)₆Fe(OH)₂]CH₃COO + 2CH₃COOH + 9Cl^-

Аналитический эффект: раствор окрашивается в красно-бурый цвет.

2.2    Количественное определение

2.2.1 Первый компонент (по хлорид-иону)

1. Аргентометрия (по Мору)

Титруют 1 мл раствора 0,1М раствором серебра нитрата до оранжево-желтого окрашивания (индикатор - калия хромат).

Cl^- + AgNO₃ → AgCl↓ + NO₃^-

AgNO₃ + K₂CrO₄ → Ag₂CrO₄↓ + 2KCl - в точке титрования

2. Аргентометрия (по Фольгарду)

Добавляют избыток (точное количество) первого титранта AgNO₃. Его остаток отитровывают вторым титрантом NH₄NCS до красного окрашивания (индикатор - железоаммонийные квасцы).

Cl^- + AgNO₃ → AgCl↓ + NO₃^-

AgNO₃ + NH₄NCS → AgNCS↓ + NH₄NO₃

3NH₄NCS + FeNH₄(SO₄)₂ → Fe(NCS)₃ + 2(NH₄)₂SO₄ - в точке титрования

3. Аргентометрия (по Фаянсу)

Титруют 1 мл раствора 0,1М раствором серебра нитрата до образования бледно-розового раствора над осадком (индикатор - флуоресцеин).

4. Меркуриметрия

Тутруют раствором нитрата ртути (II) до образования красного осадка (индикатор - дифенилкарбазон)

5. Меркурометрия

Титруют раствором нитрата ртути (I) до обесцвечивания раствора (индикатор - тиоцианат железа (III))

2.2.2 Второй компонент (по ацетат-иону)

1. Ацидиметрия

К 2 мл раствора прибавляют 3-5 мл эфира, 2 к. раствора метилового оранжевого, 1 к. раствора метиленового синего и титруют 0,1М раствором соляной кислоты при взбалтывании до перехода зеленой окраски в фиолетовую, сходную с окраской контрольного раствора.

2. Фотоколориметрический метод

Помещают 5 мл раствора в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят до метки водой (раствор А).

К 5 мл раствора А прибавляют 1 мл 1% раствора железа(III) хлорида, 4 мл воды и перемешивают. Через 50 мин. измеряют оптическую плотность (А₁) окрашенного раствора при длине волны около 370 нм в кювете с толщиной слоя 3 мм. Окраска устойчива 15-20 мин.

Раствор сравнения - смесь 1 мл 1% раствора железа (III) хлорида и 9 мл воды (готовят одновременно с окрашенным анализируемым раствором).

Параллельно в тех же условиях проводят реакцию с 5 мл раствора СО натрия ацетата (0,0026 г) и измеряют оптическую плотность (А₂).

2.3    Вывод

Из всех возможных методик количественного анализа данной лекарственной формы приведенного состава были выбраны:

- фотоколориметрия (для Натрия ацетата);

- аргентометрия по Мору (для Натрия хлорида).

Из всех возможных методик качественного анализа данной лекарственной формы приведенного состава были выбраны:

- образование осадка хлорида серебра (для хлорид-иона);

- окрашивание пламени горелки (для иона натрия);

- образование этилацетата (для ацетат-иона).

3. Экспериментальная часть

3.1    Специфичность

3.1.1 Установление специфичности в тестах «Испытание на подлинность»

Следует убедиться в отсутствии положительного эффекта реакции на сопутствующие вещества: другие ингредиенты лекарственного средства и вспомогательные вещества.

Практическое установление специфичности

Были приготовлены три модельные смеси состава:

Первая:

1. Натрия хлорида 0,5 г

2.       Натрия ацетата 0,2 г

3.       Воды очищенной до 100 мл

Вторая:

1. Натрия ацетата 0,2 г

2.       Воды очищенной до 100 мл

Третья:

1. Натрия хлорида 0,5 г

2.       Воды очищенной до 100 мл

Для проведения валидационной оценки, с тремя модельными смесями были проведены следующие реакции:

1. Хлорид-ион

К 0,5 мл модельного раствора прибавили по 0,5 мл HNO₃ разб. и раствор AgNO₃ 0,1М. Образовался белый творожистый осадок, растворившийся в растворе аммиака.

2. Ион натрия

На шпатель была помещена капля раствора и внесена в пламя горелки. Наблюдалось окрашивание пламени в желтый цвет.

3. Ацетат-ион

Упаривали 10 мл раствора на водяной бане до 1 мл, прибавляли 0,5 мл кислоты серной конц., 1 мл спирта этилового 96% и нагревали. Ощущался запах этилацетата.

CH₃COONa + CH₃CH₂OH → CH₃COOC₂H₅↑ + NaOH

3.1.2 Установление специфичности в тестах «Количественное определение»

Следует убедиться, что растворители и сопутствующие компоненты не вступают в реакцию с титрантом, а также необходимо удостовериться в специфичности индикатора.

1. Для проведения специфичности Хлорида натрия использовали титриметрический метод анализа. Для чего брали три модельные смеси. Титрование проводилось по следующей методике: к 5 мл навески прибавляли 2 мл воды, 2 капли K₂CrO₄ и титровали 0,1М раствором AgNO₃ до появления оранжево-желтой окраски.

NaCl + AgNO₃ → AgCl↓ + NaNO₃

AgNO₃ + K₂CrO₄ → Ag₂CrO₄↓ + 2KNO₃

2. Для проведения специфичности Ацетата натрия использовали фотоколориметрический метод анализа. Для этого использовали 3 модельные смеси. Определение проводилось следующим образом: помещали 5 мл раствора в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводили до метки водой (раствор А). К 5 мл раствора А прибавляли 1 мл 1% раствора FeCl₃, 4 мл воды и перемешивали. Через 50 мин измерили оптическую плотность окрашенного раствора при длине волны около 490 нм в кювете с толщиной слоя 3 мм. Параллельно готовили раствор сравнения - смесь 1 мл 1% раствора FeCl₃ и 9 мл воды. Параллельно в тех же условиях проводили реакцию с 5 мл раствора СО натрия ацетата (0,0026 г) и измеряли оптическую плотность.

Результаты испытания на специфичность представлены в таблице 1 и 2

Табл 1. Подлинность

Табл 2. Количественное определение

3.1.3 Вывод

По результатам экспериментов можно сделать заключение о специфичности выбранных методик определения подлинности и количественного определения.

3.2    Прецизионность (повторяемость)

Для установления повторяемости было проведено 6 параллельных определений содержания компонента в модельной смеси.

3.2.1 Опеделение прецизионности в тесте «Количественное определение» титриметическим методом

Для этого из модельной смеси 3 было отобрано 6 аликвот, которые оттитровали раствором нитрата серебра 0,1М. Результаты измерений представлены в таблице 3.

Табл 3. Результаты определения прецизионности титриметрическим методом

SD= RSD= X_i=

T=M×Mм×

Mм=58,44

М=0,1М

K=1,00

P=1000 мл

a=5 мл

3.2.2 Определение прецизионности в тесте «Количественное определение» фотоколоримитрическим методом

Для этого из модельной смеси 2 было приготовлено 6 аликвот. Проведено 6 имерений оптической плотности. Результаты представлены в таблице 4.

Табл. 4 Результаты определения прецизионности фотоколориметрического метода

SD= RSD= X_i=

A_ст(ГСО)=0,050

P=100 мл

Cст=0,0026

a=5 мл

V=5 мл

W₁=25 мл

W₂=10 мл

3.2.3 Вывод

По результатам экспериментов можно сделать заключение о неподтверждении прецизионности методики «Количественное определение» фотоколориметрическим методом Натрия ацетата, т. к. величина относительного стандартного отклонения превышает предельное значение, рекомендованное АОАС (RSD=2,7% для 1% действующего вещества).

Методика «Количественное определение» титриметрическим методом Натрия хлорида прецизионна, т. к. величина относительного стандартного отклонения не превышает предельное значение, рекомендованное АОАС (RSD=2,7% для 1% действующего вещества)

3.3 Линейность

При определении линейности следует убедиться в наличии прямой пропорциональной зависимости оптической плотности от концентрации или количества определяемого вещества в анализируемой пробе.

3.3.1 Определение линейности количественного определения Натрия хлорида титриметрическим методом в модельной смеси 1

Для этого было приготовлено шесть опытных образцов из шести разных навесок с точно известным количеством определяемого вещества и проведено титрование. Навески были подобраны с таким расчетом, чтобы на титрование было израсходовано не менее 1 мл и не более 10 мл титрованного раствора.

Результаты представлены в таблице 5. По данным таблицы 5 был построен график 1 зависимости найденного содержания вещества от объема титранта, пошедшего на титрование.

Табл. 5 Результаты определения линейности титриметрического метода

Все экспериментальные точки находятся вблизи линии тренда. Была составлена таблица и вычислен коэффициент корреляции.

Табл. 6 Вычисление коэффициента корреляции

r=

3.3.2 Определение линейности количественного определения Натрия ацетата фотоколориметрическим методом в модельной смеси 1

Данный опыт провести невозможно, т. к. это метод не прошел тест на прецизионность.

3.3.3 Вывод

По результатам эксперимента можно сделать вывод о линейности методики определения Натрия хлорида титриметрическим методом, т. к. коэффициент корреляции больше критического значения (r=0,99).

3.4    Правильность

Данным тестом проверялось наличие или отсутствие систематической погрешности.

3.4.1 Определение правильности количественного определения Натрия хлорида титриметрическим методом.

Данные для обработки были взяты из табл. 5, по которым был рассчитан t-критерий.

y=ax+b

a= 0,935

b=

b= 0,017

=0,15

=2,57

3.4.2 Определение правильности количественного определения Натрия ацетата фотоколориметрическим методом

Данный опыт провести невозможно, т. к. это метод не прошел тест на прецизионность.

3.4.3 Вывод

Результаты расчетов показали, что <. Это говорит о минимальном (допустимом) влиянии систематической погрешности на результаты эксперимента.

Примечание.

В данной работе построение графиков и математические расчеты были произведены с использованием программы Excel (Microsoft Office 2007).

Список литературы

1)   Государственная фармакопея X

2)      Государственная фармакопея XI

3)      Качественный анализ органических лекарственных средств: учебное пособие / [авт., ред.].-Пятигорск, 2007.

4)      Муравьев И.А. Технология лекарств. Изд. 3-е, перераб. и доп. Т. II, М., «Медицина», 1980.

5)      Руководство к производственной практике по внутриаптечному контролю качества лекарственных средств: учебное пособие / Е. В. Компанцева, Т. Т. Лихота, Г. И. Лукьянчикова, Г.В. Сеньчукова / под редакцией Е.В. Компанцевой, - Пятигорск, 2006.

6)      Фармацевтическая химия. В 2 ч.: Ч.1. Общая фармацевтическая химия; Ч. 2. Специальная фармацевтическая химия: Учеб. для вузов.- Пятигорск, 2003.